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乙酰βD葡萄糖试剂盒
测定意义:
NAG是溶酶体中的一种酸性水解酶,广泛存在于各种组织、体液和细胞中,以前列腺和肾近曲小管细胞内含量高。NAG活性变化与机体某些病理状态密切相关。
测定原理:
NAG分解β-N-乙酰氨基葡萄糖苷生成对-硝基,后者在400nm有大吸收峰,通过测定吸光值升高速率来计算NAG活性。
注 意 :
正式测定前务必取2-3个预期差异较大的样本做预测定
自备用品:
酶标仪/可见分光光度计、台式离心机、水浴锅、可调式移液器、96孔板/微量石英比色皿、研钵、冰和蒸馏水。
粗酶液提取:
1、细菌或培养细胞:先收集细菌或细胞到离心管内,离心后弃上清;按照细菌或细胞数量(104个):提取液体积(mL)为500~1000:1的比例(建议500万细菌或细胞加入1mL提取液),超声波破碎细菌或细胞(冰浴,功率20%或200W,超声3s,间隔10s,重复30次);15000g 4℃离心10min,取上清,置冰上待测。
2、组织:按照组织质量(g):提取液体积(mL)为1:5~10的比例(建议称取约0.1g组织,加入1mL提取液),进行冰浴匀浆。15000g 4℃离心10min,取上清,置冰上待测。
3、血清(浆)样品:直接检测。
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