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总抗氧化活性试剂盒,总抗氧化含量测试盒 |
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总抗氧化活性试剂盒
研究意义:
测定对象中各种抗氧化物质和抗氧化酶等构成总抗氧化水平。在生物学、医学和药学研究中常常检测血浆、血清、唾液、尿液等各种体液,细胞或组织等裂解液、植物或中草药抽提液及各种抗氧化物(antioxidant)溶液的总抗氧化能力。
测定原理:
DPPH·为稳定的自由基 ,溶于,等极性溶剂中,在 515nm 处有大吸收。向DPPH·溶液中加入抗氧化剂时,会发生脱色反应,因此可用吸光度的变化并以 Trolox 作为对照体系量化抗氧化物质的抗氧化能力。
注 意:
正式测定之前选择 2-3 个预期差异大的样本做预测定。
自备实验用品:
恒温水浴锅、低温离心机、酶标仪、96 孔板和蒸馏水。
样品的制备:
(1) 血清、血浆、唾液或尿液等液体样品
血浆(制备时可以使用肝素或柠檬酸钠抗凝,不宜使用 EDTA 抗凝)4℃,5000rpm 离心
10min,取上清待测。血清、唾液或尿液样品直接用于测定,也可以-80℃冻存(不宜超过
30d)后再测定。
(2) 组织样品
按照组织质量(g):提取液体积(mL)为 1:5~10 的比例(建议称取约 0.1g 组织,加入 1mL 提取液)进行冰浴匀浆,然后 10000g,4℃离心 10min,取上清,置冰上待测。
(3) 细胞样品
按照细胞数量(104 个):提取液体积(mL)为 500~1000:1 的比例(建议 500 万细胞加入 1mL 提取液),冰浴超声波破碎(功率 200W,超声 3s,间隔 10s,重复 30 次);10000g,4℃离心 10min,取上清,置冰上待测。
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