来源:上海通蔚实业有限公司 时间:2024-05-10 01:13:45 [举报]
酸性磷酸酶活性测试盒
测定意义:
ACP在酸性条件下催化磷酸单酯水解称无机磷酸,常见于巨噬细胞的溶酶体内。ACP常用于前列腺癌的辅助诊断。
测定原理:
在酸性环境中,ACP催化对硝基苯磷酸二钠水解生成4-硝基,在405nm有特征光吸收;通过测定405nm吸光度增加速率,来计算ACP活性。
注 意:
正式测定之前选择2-3个预期差异大的样本做预测定。
自备仪器和用品:
酶标仪、96孔板、台式离心机、水浴锅、可调式移液器和蒸馏水。
粗酶液提取:
1.组织:按照组织质量(g):试剂一体积(mL)为1:5~10的比例(建议称取约0.1g组织,加入1 mL试剂一)进行冰浴匀浆,4℃、10000g离心10 min,取上清液待测。
2.细菌或细胞:按照细菌或细胞数量(104个):试剂一体积(mL)为500~1000:1的比例(建议500万细胞加入1 mL试剂一),冰浴超声波破碎细胞(功率300w,超声3秒,间隔7秒,总时间3 min);然后10000g,4℃,离心10min,取上清置于冰上待测。
3.血液可直接测定,或者适当稀释后测定。
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