土壤谷-氨酰胺酶S-GLS检测试剂盒土壤谷-氨酰胺酶S-GLS活性测试盒

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测定意义：

GLS（EC 3.5.1.2）存在于高等动物和某些细菌以及植物根中，催化谷-氨酰胺水解成谷氨酸和氨，在氮素代谢中具有重要调控作用，尤其是调节游离氨含量和尿素代谢。

注    意：
正式测定前务必取2-3个预期差异较大的样本做预测定

测定原理：

S-GLS催化谷-氨酰胺水解成L-谷氨酸和氨，利用奈氏试剂检测氨增加的速率，即可计算其酶活性。

需自备仪器和用品：

台式离心机、可见分光光度计/酶标仪、微量石英比色皿/96孔板、可调式移液枪、研钵、甲苯、冰和双蒸水。

土壤谷-氨酰胺测试盒

酶活性计算：

a.用微量石英比色皿测定的计算公式如下

标准条件下测定的回归方程为y = 3.8488x+0.0057；x为标准品浓度（μmol/mL），y为吸光值A。

单位定义：每g土样每min催化谷-氨酰胺生成1nmol 氨定义为一个酶活力单位。

 S-GLS（nmol/min/g 土样）＝(ΔA-0.0057)÷3.8488×V反总÷W÷T=2.27×(ΔA -0.0057)÷W。

V反总：反应体系总体积：1.05mL；T：反应时间，2h=120min；W：样本质量，g; 1000，μmol到nmol换算系数。

b.用96孔板测定的计算公式如下

标准条件下测定的回归方程为y = 1.9244x+0.0057；x为标准品浓度（μmol/mL），y为吸光值A。

单位定义：每g土样每min催化谷-氨酰胺生成1nmol 氨定义为一个酶活力单位。

 S-GLS（nmol/min/g 土样）＝(ΔA-0.0057)÷1.9244×V反总÷W÷T=4.55×(ΔA -0.0057)÷W。

V反总：反应体系总体积：0.525mL；T：反应时间，2h=120min；W：样本质量，g; 1000，μmol到nmol换算系数。